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還沒了解IGF-1試劑盒的看這里!

2020-12-16 瀏覽次數(shù):1674

    IGF-1試劑盒是一種固相的酶聯(lián)免疫實驗,采用爭競法的原理。實驗開始前將病人樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品先酸化和中和好。包被板的微孔中包被了單克隆抗體,這種單克隆抗體對IGF-1分子上的某單一抗原位點具有特異性。將預(yù)先處理好的樣品與酶聯(lián)物(生物素標(biāo)記的IGF-1)在室溫下溫育。之后洗板,再加入酶復(fù)合物(辣根過氧酶標(biāo)記的鏈親和素)并溫育。加入底物溶液后,溶液所顯示的顏色強度與病人樣品中IGF-1的濃度成反比。
  IGF-1試劑盒種屬有人、大鼠、小鼠、猴、兔、豬、馬、魚、雞、鴨、羊等等;樣本包括血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織標(biāo)本等。如何處理IGF-1試劑盒的樣本:
  1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
  2、血漿:應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
  3、尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
  4、細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
  5、組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

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